Identification of Novel Immunomodulatory Strategies to Tackle HIV-1 Persistence

Resumen

La terapia antirretroviral (TAR) ha mejorado drásticamente la esperanza de vida de las personas con VIH (PLWH), pero no es curativa y debe tomarse de por vida. La persistencia del VIH en reservorios latentes transcripcionalmente silenciosos pero competentes para la replicación es una barrera importante para la cura del VIH. Por lo tanto, es necesario el desarrollo de nuevas estrategias dirigidas a eliminar el reservorio de VIH latente para avanzar hacia la cura del VIH. Entre ellas cabe destacar la estrategia conocida como "shock and kill" que utiliza agentes reversores de latencia (LRA) para inducir la transcripción viral, exponiendo las células latentemente infectadas a la eliminación por parte del sistema inmune o la estrategia conocida como "block and lock", la cuál persigue el silenciamiento permanente de la transcripción viral utilizando agentes promotores de latencia (LPA)._x000D_ Teniendo en cuenta la heterogeneidad del reservorio latente que comprende células de distintos linajes, hemos desarrollado modelos celulares de latencia del VIH-1 no clonales utilizando líneas celulares de origen linfoide o mieloide, con el objetivo de identificar nuevos LRA. Realizamos un cribado de alto rendimiento (HTS) de una biblioteca de compuestos utilizando estos modelos de latencia del VIH-1, lo que permitió la identificación de LRA con actividad en múltiples tipos celulares. Identificamos dos clases de agentes inmunomoduladores como nuevos LRA en estos modelos: inhibidores de IκB/IKK (IKKis) e inhibidores de JAK (JAKi). Como se ha descrito anteriormente para acitretina y los agonistas de TLR, la modulación de la inmunidad innata podría afectar la latencia viral y contribuir a la eliminación del reservorio de VIH._x000D_ En el primer capítulo de la tesis, nos centramos en validar la capacidad como LRA de los IKKis en ambos modelos celulares de latencia del VIH. Nuestros resultados demuestran el potencial LRA de los IKKis, tanto en células de origen linfoide como mieloide. En particular, los inhibidores selectivos de TBK1 e IKKε fueron capaces de revertir la latencia viral a través de un mecanismo dirigido a la inducción de la transcripción del VIH mediada por NF-κB, tanto in vitro como ex vivo. Dado que la activación inmunitaria asociada con el VIH y las respuestas hiperinflamatorias persisten en las PLWH, también evaluamos el efecto de IKKis en la función de las células inmunitarias y observamos que la actividad LRA de IKKi no alteró el estado de activación en las células T CD4+, a la vez que presentaba una disminución significativa de las respuestas proinflamatorias._x000D_ En el segundo capítulo de la tesis, evaluamos la capacidad LRA de los JAKi como una potencial estrategia terapéutica novedosa para la cura del VIH-1. Contrariamente al papel inhibidor de la reactivación viral descrito anteriormente para determinados JAKi, identificamos una subclase de inhibidores selectivos de JAK2 (JAK2i) capaces de revertir significativamente la latencia del VIH. En particular, el JAK2i fedratinib, revirtió la latencia del VIH-1 in vitro en los modelos linfoides y mieloides no clonales y también ex vivo en células T CD4+ de PLWH, independientemente de la expresión de JAK2. Para delinear el mecanismo de acción subyacente a la actividad LRA inducida por los JAK2i, realizamos un análisis transcriptómico completo, identificando una regulación positiva significativa de la expresión de IRF7 a pesar del bloqueo de la vía JAK-STAT y la regulación negativa de citocinas y quimiocinas proinflamatorias. Además, los niveles de expresión de IRF7 se correlacionaron positivamente con la capacidad de reversión de la latencia del VIH de los JAK2i y otros LRA. En conjunto, estos resultados demuestran el potencial de la modulación inmunitaria innata para reducir el reservorio viral a través de la vía mediada por IRF7.

Fecha de lectura	30 sept 2022
Idioma original	Inglés
Supervisor	Ester Ballana Guix (Director/a)