Role of NSAID/RHO-GTPase mediated signalling in glia inflammation in primary and in organotypic cultures

Considerables estudios epidemiológicos han establecido que el tratamiento con drogas antiinflamatorias no esteroidales (NSAIDs) reducen el riesgo de la enfermedad de Alzheimer (AD), pero todavía, su mecanismo de acción es controvertido. La hipótesis general de este proyecto es que la familia de las Rho-GTPases, que controla la dinámica del citoesqueleto, es un destino molecular de las NSAIDs en el cerebre, y que las NSAIDs proporcionan protección en AD vía las Rho-GTPases reduciendo la inflamación crónica y mejorando la plasticidad sináptica. El proyecto presenta como nuevas ideas que los cambios en el citoesqueleto de actina juegan un papel en las enfermedades neurodegenerativas, y que las NSAIDs pueden regular la plasticidad sináptica independientemente de sus efectos anti-inflamtorios. El estudio será el esfuerzo coordinado de tres grupos por conseguir uno análisis comprensivo del papel de las Rho-GTPases en la protección intercedida por las NSAID. El subproyecto 1 caracterizará el efecto de las NSAIDs y las RhoGTPases (Rho, Rao, Cdc42) en la reactividad inflamatoria de astrocitos y microglia en cultivo y en cultivos organotípicos, estudiando diversos parámetros de inflamación. Las actividades de las RhoGTPases serán moduladas o farmacológicamente o molecularmente, por infección con adenovirus conteniendo "el doble negativo" o "las formas constitutivamente activas" de las Rho-GTPases. El Subproyecto 2 analizará en cortes hipocampales si el NSAID ibuprofeno modula la LTP (expresión funcional de la plasticidad sináptica). Se explorarán los mecanismos moleculares implicados, en particular los mecanismos dependientes de cGMP, que es una de las vías de señalización clave de la LTP. El Subproyecto 3 agasajará el análisis sobre la plasticidad sináptica estudiante la reorganización en cultivos. Finalmente, en este subproyecto se caracterizará la expresión de las Rho-GTPases en cerebres de AD o de ratones que sobre-expressin la proteína precursora amiloide (APP)