Etiologia de la resistència a la insulina i anàlisi de gens candidats mitjançant mutagènesi dirigida

Objetivo: El análisis funcional de genes que determinan la sensibilidad a la insulina, así como de la contribución de mutaciones halladas en pacientes en la etiopatogenia de la resistencia a la insulina. Diseño: Obtención de animales defectivos para los genes de la HKII y la GS muscular mediante mutagénesis dirigida en células embrionarias totipotenciales. Ámbito de Estudio: Análisis del fenotipo resultante de la mutación de cada uno de los genes, tanto en animales heterocigotos como homocigotos para el defecto. Sujetos de estudio: Ratones de las cepas 129sv, CD-1, C57BL6, y cepa 129sv con mutaciones específicas en los genes de la HKII y la GS muscular. Instrumentalización: Impacto funcional y estructural de la mutación en los tejidos donde se expresa el gen mutado. Repercusión de la mutación en la fisiología general del animal, evaluándose el desarrollo de resistencia a insulina y el establecimiento, a más largo plazo, de procesos patológicos relacionados (NIDDM, cardiopatía, dislipidemia, hipertensión, obesidad, etc.) Determinaciones: En estos modelos se estudiará la expresión del gen mutado, parámetros metabólicos y de expresión de genes endógenos. También se realizará un estudio histopatológico de los órganos y tejidos donde se expresa el gen mutado y de los otros órganos o tejidos que resulten afectados. Se realizarán pruebas funcionales y clínicas, tests de tolerancia a la glucosa y de sensibilidad a insulina, así como la monitorización clínica de los sujetos de estudio y pruebas específicas de los diferentes órganos previsiblemente afectados en los ratones mutantes.