Estudis moleculars sobre la ribonucleasa A: catàlisi, interacció enzim-substrat i plegament

La ribonucleasa A de páncreas bovino es una proteína que ha sido estudiada tanto a nivel estructural como funcional constituyendo un buen modelo para el conocimiento de la relación estructura-función de las nucleasas y, en general, de enzimas que actúan sobre sustratos poliméricos. En este proyecto de investigación en el que se plantean estudios de la ribonucleasa A centrados en la catálisis y la interacción con el ARN se analizará la función de los centros de interacción de fosfato no catalíticos en los que el enzima interacciona, de forma electrostática, con el ARN y que se encuentran adyacentes al centro catalítico. Asimismo, se analizará la movilidad de residuos del centro catalítico y de centros no catalíticos con el fin de profundizar en un modelo no estático de interacción enzima-sustrato. En los estudios del proceso de plegamiento de la proteína se analizará el centro de nucleación que se localiza en la región C-terminal, en concreto la contribución de las interacciones hidrofóbicas de este fragmento sobre la estabilidad global de la enzima. Para analizar estos procesos, se obtendrán formas modificadas de la ribonucleasa A por mutagénesis dirigida.