Estudis dels mecanismes de regulació mitjançant fosforil·lació de proteïnes en llevat

La fosforilación reversible de proteínas es uno de los mecanismos de modificación de proteínas que juegan un papel crítico e todas las formas de vida al regular importantes y diversas funciones celulares. Las proteínas quinasas (PQ) y fosfatasas (PF) son, respectivamente, los enzimas responsables de la fosforilación y desfosforilación de los substratos, modificando sus actividades enzimáticas, localización celular o moléculas a las que se unen. El desciframiento de los genomas de diversos organismos eucariotas ha puesto de manifiesto que más del 2% de los mismos están dedicados a genes que codifican PQ y PF. Ha evidenciado, asimismo, que estamos lejos aún de entender por completo las complejas vías de señalización que tienen lugar en la célula. Es por ello que se hace evidente la necesidad de aplicar nuevas estrategias para un más rápido avance en este campo. Planteo el uso de la combinación de las poderosas tecnologías de genómica y proteómica en conjunción con técnicas de genética y bioquímica para estudiar los eventos de señalización intracelular a través de la fosforilación de proteínas utilizado la levadura S. cerevisiae como modelo. Mediante microarrays de DNA se identificarán los patrones de expresión en respuesta a la eliminación de ciertas PQ y PF no esenciales, tanto en condiciones estándar como sujetas a un panel de diferentes situaciones de estrés. La agrupación de las proteínas en función de la similitud de los perfiles de expresión que sus ausencias provocan nos permitirán asignar nuevas o adicionales funciones celulares a las PQ y PF estudiadas. Además, se utilizarán diferentes técnicas de proteómica tanto para identificar nuevos mecanismos reguladores de PQ y PP como para la búsqueda de substratos de las mismas a escala global