Estudi de la inducció i la persistència de l'aneuploidia després de l'exposició \i in vivo\i0 a radiacions ionitzants

En la especie humana no existe probablemente un riesgo genético de mayor importancia que la aneuploidía. Es la causa más común de defectos en el desarrollo mental y de abortos espontáneos y se ha relacionado con la aparición y desarrollo del cáncer. Sin embargo, a pesar de su importancia en la salud humana, poco se conoce acerca del efecto aneugénico de las radiaciones ionizantes. El presente proyecto de investigación concierne a la investigación de la inducción y persistencia de la aneuploidía tras la exposición in vivo a radiaciones ionizantes. Este trabajo se llevará a cabo mediante la aplicación de técnicas de hibridación in situ fluorescente sobre células somáticas y germinales de ratón. Debido a que en el mercado no existen sondas pericentroméricas de ratón, éstas se producirán en nuestro propio laboratorio mediante técnicas de microdisección, amplificación y marcado del DNA a fin de poderse utilizar en protocolos de FISH. Los objetivos concretos de la presente propuesta son: 1. Generación de sondas paracentroméricas de DNA específicas para tres cromosomas de ratón. 2. Análisis de pérdida anafásica y de no-disyunción en linfocitos de bazo de ratones irradiados. Dicho análisis se realizará en núcleos interfásicos de linfocitos binucleados. 3. Análisis del contenido cromosómico de los micronúcleos mediante su microdisección y pintado reverso sobre metafases de ratón. 4. Análisis de la inducción y persistencia de la aneuploidía en espermatozoides de ratón tras su exposición a radiaciones.