Elements transponibles i deficiència en reparació del DNA com a factors determinants de la susceptibilitat de Drosophila melanogaster a la mutació induïda

La mutación espontánea e inducida viene modulada por múltiples factores. Se han descrito muchas cepas de \i Drosophila melanogaster\i0 que manifiestan un elevado grado de inestabilidad genética así como individuos con una elevada tasa de mutación somática. Siguiendo con la línea iniciada por nuestro grupo estos últimos años (incluida en los proyectos SAF92-0525 y SAF94-0697 de la CICYT) pretendemos profundizar en el estudio de dos factores relevantes en la determinación de la susceptibilidad a la mutación: la presencia de elementos transponibles y la deficiencia en mecanismos de reparación del DNA. La reversión espontánea e inducida en los mutantes caracterizados por la presencia de retrotransposones puede darse hipotéticamente por múltiples causas. El análisis molecular que hemos realizado de revertientes inducidos en tales mutantes de \i D. melanogaster\i0 por tratamiento químico y físico pone de manifiesto el papel fundamental que juegan los \i loci\i0 así como en otros mecanismos implicados en la reversión de los mutantes insercionales. Por otra parte, la inestabilidad de secuencias repetidas simples características de muchas anomalías genéticas humanas, inclusive algunos cánceres, puede deberse a la deficiencia en la reparación de falsos apareamientos. Dicho mecanismo de reparación está poco estudiado en eucariotas. Pretendemos aplicar la técnica de AP-PCR en el estudio, caracterización e identificación de mutantes deficientes para tal mecanismo en \i D. melanogaster\i0 . El estudio se completará con el análisis de la inestabilidad en microsatélites concretos mediante PCR y con el aislamiento de genes que intervienen en el sistema de reparación de falsos apareamientos utilizando cebadores degenerados de secuencias consenso de estos genes.