Determinació i anàlisi de seqüencia dels pèptids associats a molècules MHC de classe II expressades en cèl.lules epitelials per tècniques d'espectrometria de masses: rellevancia en autoimmunitat

En las enfermedades autoinmunes órgano-específicas las células epiteliales, dianas del daño tisular, expresan ectópicamente HLA de clase II y se las considera posibles responsables del mantenimiento de una respuesta autorreactiva. Sin embargo, ni los autoantígenos ni la función de las moléculas de HLA de clase II del epitelio están definidos en la mayoría de las enfermedades autoinmunes humanas. Las moléculas de MHC de clase I y II se expresan en la superficie celular asociadas a un péptido corto que, en caso de infección, procede de los antígenos del patógeno y, en situaciones fisiológicas, de moléculas propias. Los péptidos que se asocian a las moléculas de clase II expresadas en el epitelio son hasta ahora desconocidos. Actualmente existen técnicas que permiten identificar los péptidos naturalmente asociados a MHC de clase II en células que constitutivamente lo expresan. La técnica consiste en la elución ácida de los péptidos bajo peso molecular a partir de moléculas de MHC purificadas de extractos celulares por inmunoprecipitación. La secuenciación de estos péptidos por técnicas de espectrometría de masas ha permitido identificar las moléculas origen de los distintos péptidos, con altísima resolución. En este proyecto nos proponemos caracterizar, mediante espectrometría de masas, los péptidos naturales asociados a MHC en células epiteliales procedentes de tejidos autoinmunes humanos así como de una línea celular epitelial que expresa MHC humano por transfección, con el fin de identificar los autoantígenos y caracterizar los epítopos reconocidos por células T en autoinmunidad tiroidea y Diabetes Mellitus de tipo 1. El conocimiento de estos epítopos supone un paso importante en el desarrollo de terapias específicas y en el estudio de los mecanismos inherentes a los procesos autoinmunes.