Desenvolupament d'adenovirus integratius Gutless Helper-Free com vectors de teràpia gènica. Noves estratègies basades en la utilització conjunta del transposon humà HSMAR2 i la recombinasa PHIC

Los adenovirus "gutless" integrativos son uno de los vectores más atractivos en el campo de la terapia génica pues no solo inducen activación de la respuesta inmune en el huésped al carecer de genes virales, si no que además permiten la integración del gen terapéutico en el genoma de la célula diana. En la generación de estos vectores utilizaremos el transposón mariner humano Hsmar2 que recientemente hemos reconstruido genéticamente y la recombinasa unidireccional C31. En comparación con otros virus "gutless" y/o integrativos, la elección de estos sistemas supone que por primera vez se impida la contaminación de la preparación viral por virus "helper" y que al utilizarse un transposón humano (en lugar de salmónido o invertebrado) su eficiencia sea mucho mayor al minimizar la influencia de factores nucleares específicos de especie. Estas ventajas permitirán la producción de adenovirus "gutless" integrativos de calidad GMP que podrán ser utilizados en ensayos clínicos humanos, lo que no es posible realizar con la tecnología, sistemas y estrategias actuales de producción. Los nuevos adenovirus "gutless" intefrativos se caracterizarán in vitro para determinar la ausencia de virus "helper" contaminantes y analizar la especificidad y eficiencia de integración. Posteriormente, los virus se administrarán a distintos órganos in vivo, y se analizará tanto su capacidad para inducir la respuesta inmune del huésped como su eficiencia en cuanto a la duración y nivel de expresión de genes utilizados