Clonatge, seqüenciació i caracterització dels gens del plàsmid pKM101 que codifiquen resistència a les 4-quinolones en "Escherichia coli"

En trabajos previos realizados en nuestro laboratorio hemos demostrado que el plásmido pKM101 es portador de algún gen, diferente de los "mucAB", que confiere resistencia a "E. coli" frente a las 4-quinolonas (4-Qs), tales como el ácido nalidíxico o la ciprofloxacina. Los principales objetivos que se plantean en este proyecto son: a) la clonación, secuenciación y caracterización de dicho gen o genes; b) el estudio de su expresión y regulación; c) la determinación de si este mecanismo de resistencia es específico frente a inhibidores de la ADN girasa (como las 4-Qs) o puede hacerse extensivo a otros compuestos que producen diferentes tipos de lesión. Para conseguir los objetivos propuestos, se subclonarán diferentes regiones del pKM101 y se determinará cuál de ellas da lugar al fenotipo de resistencia, mediante un método rápido que hemos desarrollado en nuestro laboratorio. Posteriormente