Caracterització i enginyeria d'inhibidors de carboxipeptidases d'\i Hirudo medicinalis\i0

Los inhibidores de proteasas de naturaleza proteica resultan interesantes tanto desde un punto de vista básico como aplicado. Su interés biomédico reside en parte en su potencial uso como agentes terapéuticos para la supresión de los efectos nocvos de las reacciones de defensa en las que está involucrada la proteólisis. Por parte, muchos inhibidores de poteasas son moléculas de masa molecular reducida, susceptibles de ser objeto de estudios acerca de su proceso de plegamiento y al empleo de técnicas de ingeniería de proteínas para el diseño de funcionalidades nuevas o modificadas. Se han aislado un cierto número de inhibidores de serina-proteasas a partir de \i Hirudo medicinalis\i0. En el presente proyecto proponemos el aislamiento de un inhibidor de carboxipeptidasas a partir de la misma fuente natural, un tipo de inhibidor todavía no descrito, pero cuya existencia está grantizada por la detección de actividad inhibidora de carboxipeptidasas (del tipo A y del tipo B) en los extractos de estos especímenes. Una vez se haya aislado y caracterizado la proteína mediante estrategias clásicas de química de proteínas, se procederá a su clonaje y a la secuenciación de su cDNA. En la actualidad se están dedicando muchos esfuerzos al diseño de inhibidores quiméricos bifuncionales con el objeto de estudiar su aplicación como agentes terapéuticos. Se intentrá la construcción de un inhibidor quimérico doble que contenga las funciones inhibidoras de triptasa y carboxipeptidasa de patata. Se ensayará la capacidad inhibidora de las moléculas naturales, recombinantes y quiméricas con el fin de estimar las posibilidades de su aplicación en el control de procesos de interés biomédico (anafilaxis local, inflamación, etc)