Avaluació farmacològica de noves molècules multipotents per al tractament de la malaltia d'Alzheimer

El objetivo de este subproyecto es llevar a cabo la evaluación biológica de nuevas moléculas multipotentes para su uso terapéutico en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer (...). Estas moléculas han sido por tanto diseñadas para interaccionar tanto con el sistema de transmisión colinérgico como aminérgico. El diseño se ha hecho partiendo de la experiencia previa de ambos grupos solicitantes y confirmado mediante cálculos de mecánica molecular y modelización molecular. Ello ha permitido obtener una molécula multifuncional en cuanto pueda interaccionar con el centro catalítico de la AchE, por contener un grupo estructural derivado del donezepillo y al mismo tiempo capaz de inhibir el centro periférico aniónico (PAS) de la AChE, por contener un grupo derivado de la naftiridina, y por tanto con actividad antiagregante del péptido beta-amiloide. Dichas moléculas contienen asimismo un grupo propargilo responsable de la inhibición de la monoaminoxidasa isoforma B (...). El diseño y síntesis son responsabilidad del IP de este proyecto coordinado, mientras que en este subproyecto se pretende evaluar in vitro las múltiples propiedades de las moléculas objeto de estudio (...). Se evaluarán las propiedades inhibidoras sobre ambas enzimas: la AchE y BchE, determinando el correspondiente valor de IC\sub 50\nosub como medida de su potencia (...). El poder antiagregante sobre el beta-amiloide se determinará mediante técnicas de fluorescencia con tioflavina T (...), y finalmente se determinará la capacidad neuroprotectora y antipoptótica en cultivos de neuroblastomas humanos tipo SHSY5Y. En ellos se utilizará la toxina beta-amiloide (fragmento 1-42) para lesionar las células e inducir la apoptosis y se valorará dicho proceso mediante la determinación de diferentes marcadores como son los cambios morfológicos de los núcleos (...), la activación de la caspasa 3, como ejecutora última de la apoptosis, la rotura del PARP (...).