Anàlisi citogenètica molecular i immunocitogenètica de l'espermatogènesi en individus infèrtils: aplicació al consell genètic

Recientes estudios indican que pacientes infértiles pueden presentar un incremento de espermatozoides aneuploides y que esta incidencia puedes ser reflejo de diferentes grados de afectación del proceso meiótico. Una posible hipótesis es que estas anomalías sean debidas a una reducción en el grado de recombinación y a anomalías del apareamiento sináptico que produzcan bloqueo meiótico y no-disyunción de bivalentes cromosómicos y que a su vez ocasionen oligozooespermia e incremento de espermatozoides con anomalías cromosómicas numéricas. Hasta el momento, son muy escasos los estudios del patrón de recombinación en individuos fértiles y no existen en individuos infértiles. Últimamente, se han descrito técnicas que combinan la immunocitogenética con el análisis citogenético molecular y que son una nueva y potente forma de detectar puntos de recombinación en extensiones de bivalentes en profase I. Nos proponemos estudiar el proceso de recombinación meiótica y el apareamiento en espermatocitos de individuos infértiles para determinar si presentan modificaciones del patrón de recombinación y alteraciones del apareamiento sináptico con el fin de verificar la hipótesis antes indicada. Para ello aplicaremos una técnica inmunocitogenética para la detección de MLH1 en espermatocitos que permitirá determinar la frecuencia de puntos de recombinación. La distribución específica para cada uno de los 23 complejos sinaptonémicos se realizará con FISH de sondas cromosómicas, especialmente mediante la adecuación a extensiones de complejos sinaptonémicos de un nuevo método de FISH multicolor (cenM-FISH) el cual permitirá la identificación simultánea de todos los centrómeros en los espermatocitos a los que previamente se les haya detectado los puntos de recombinación.