MODIFICACIONES BIOFISICAS Y CELULARES PARA MEJORAR EL DESARROLLO EMBRIONARIO A LA VITRIFICACION DE OVOCITOS Y EMBRIONES BOVINOS PRODUCIDOS IN VITRO

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EL USO COMBINADO DE TECNOLOGIAS REPRODUCTIVAS, COMO LA OBTENCION DE OVOCITOS POR ASPIRACION FOLICULAR GUIADA POR ECOGRAFIA Y LA PRODUCCION Y TRANSFERENCIA DE EMBRIONES PRODUCIDOS IN VITRO (PIV), TIENE UN ALTO POTENCIAL TANTO PARA LA SELECCION GENETICA COMO PARA LA OPTIMIZACION DE LOS ESQUEMAS DE CRUZAMIENTO DEL GANADO BOVINO DE CARNE Y LECHE. ELLO, JUNTO A UNA METODOLOGIA EFICAZ PARA LA CRIOCONSERVACION DE OVOCITOS, PERMITIRIA CONSERVAR A LARGO PLAZO CIERTOS CARACTERES GENETICOS DE LA HEMBRA Y SUPONDRIA UN AVANCE DE LA BIOTECNOLOGIA EMBRIONARIA BOVINA. LA VITRIFICACION ES UNA TECNICA ESPECIALMENTE UTIL PARA LA CRIOCONSERVACION DE OVOCITOS Y EMBRIONES PIV O MICROMANIPULADOS; SE TRATA DE UN PROCESO SIMPLE, RAPIDO Y QUE NO REQUIERE DEL USO DE BIOCONGELADORES. ADEMAS, SE PRECISAN MENOS PASOS Y MENOS TIEMPO DE EQUILIBRIO CON LOS AGENTES CRIOPROTECTORES (ACPS). EL EXITO DE LA VITRIFICACION RADICA EN LA TRANSICION DE LAS CELULAS Y DE SU MEDIO EXTRACELULAR DE UN ESTADO LIQUIDO A UN ESTADO VITREO, SIN LA FORMACION DE HIELO. SIN EMBARGO Y HASTA LA ACTUALIDAD, LA APLICACION DE LA VITRIFICACION EN EL CAMPO DE LA REPRODUCCION VETERINARIA ES AUN MUY LIMITADA DEBIDO PRINCIPALMENTE A LA BAJA CAPACIDAD DE DESARROLLO EMBRIONARIO DE LOS OVOCITOS DESPUES DE LA VITRIFICACION. POR OTRA PARTE, LAS TASAS DE GESTACION ASOCIADAS A LA TRANSFERENCIA DE EMBRIONES PIV VITRIFICADOS SON AUN INFERIORES A LAS OBTENIDAS CUANDO LOS EMBRIONES SON TRANSFERIDOS EN FRESCO. ESTA BAJA CAPACIDAD DE DESARROLLO DE LOS OVOCITOS/EMBRIONES PIV BOVINOS ES CONSECUENCIA DE LOS DAÑOS CELULARES DERIVADOS DEL PROCESO DE CRIOCONSERVACION. LAS DOS CAUSAS PRINCIPALES DE DAÑO CELULAR SON EL DAÑO FISICO CAUSADO POR LA FORMACION DE CRISTALES DE HIELO Y EL DAÑO QUIMICO QUE RESULTA DE CAMBIOS EN LAS CONCENTRACIONES DE SOLUTO INTRACELULAR. AMBOS TIPOS DE DAÑOS PUEDEN EVITARSE, O AL MENOS REDUCIRSE, CONTROLANDO LA RESPUESTA OSMOTICA Y TOXICA DE LAS CELULAS A LOS ACPS Y MODIFICANDO LAS CONDICIONES INTRACELULARES. POR LO TANTO, PARA DISEÑAR NUEVOS PROTOCOLOS DESTINADOS A MEJORAR LA SUPERVIVENCIA Y LA COMPETENCIA EN EL DESARROLLO DE LOS OVOCITOS Y EMBRIONES PIV VITRIFICADOS, ES IMPORTANTE I) CONSIDERAR LA PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMATICA AL AGUA Y A LOS ACPS, BUSCANDO UNA ALTA PERMEABILIDAD Y UNA BAJA TOXICIDAD; Y II) MODIFICAR LA COMPOSICION CELULAR DE LOS OVOCITOS Y EMBRIONES PIV ANTES DE LA VITRIFICACION MEDIANTE EL USO DE MEDIOS DE MADURACION IN VITRO (MIV) O CULTIVO IN VITRO (CIV) DISEÑADOS ESPECIFICAMENTE PARA QUE EL OVOCITO Y EL EMBRION PUEDAN INCREMENTAR SU RESISTENCIA AL DAÑO CELULAR QUE TIENE LUGAR DURANTE LA VITRIFICACION. POR TODO ELLO, LA HIPOTESIS GENERAL DE ESTA PROPUESTA ES QUE LA COMPETENCIA DE DESARROLLO DE OVOCITOS Y EMBRIONES PIV BOVINOS VITRIFICADOS/ CALENTADOS PODRIA MEJORARSE MEDIANTE LA COMBINACION DE MEJORAS FISICAS Y BIOLOGICAS. DE ESTE MODO, SE OPTIMIZARAN LOS PROTOCOLOS DE ENTRADA Y SALIDA DE LOS CPAS EN OVOCITOS/EMBRIONES BOVINOS UTILIZANDO MODELOS MATEMATICOS DE TRANSPORTE DE MEMBRANA. ADEMAS, SE INVESTIGARAN LOS MECANISMOS DE DEFENSA MOLECULAR PROPORCIONADOS POR LAS VESICULAS EXTRACELULARES LIBERADAS POR CELULAS DE LA GRANULOSA ESTRESADAS AÑADIDAS DURANTE LA MIV Y CIV, ASI COMO SU CAPACIDAD PARA MEJORAR LA RESISTENCIA DE LOS OVOCITOS/EMBRIONES A LA VITRIFICACION AUMENTANDO ASI SU SUPERVIVENCIA Y DESARROLLO EMBRIONARIO.
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Effective start/end date1/09/2131/08/25