ESTUDIO DEL EFECTO DE LA COMPETENCIA DE DISTINTOS TIPOS DE OOCITOS CAPRINOS SOBRE LA PRODUCCION IN VITRO DE EMBRIONES EN SISTEMAS BIFASICOS DE MADURACION CON OSF (OOCYTES SECR

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LA PRODUCCION DE CABRAS, ESPECIALMENTE LAS RAZAS LECHERAS, PODRIA SER UNA GANADERIA INTERESANTE EN CONDICIONES AMBIENTALES DIFICILES Y DE ESCASEZ DE AGUA. EN COMPARACION CON EL RESTO DE LAS ESPECIES GANADERAS, LAS RAZAS CAPRINAS HAN SIDO GENETICAMENTE MENOS MEJORADAS. LA PRODUCCION IN VITRO DE EMBRIONES (PIVE) ES UNA HERRAMIENTA DE GRAN INTERES PARA LOS PROGRAMAS DE MEJORA ANIMAL. DURANTE LOS ULTIMOS 30 AÑOS SE HA INVESTIGADO MUCHO EN LA PIVE SOBRE TODO EN VACUNO. EN PEQUEÑOS RUMIANTES, Y ESPECIALMENTE EN CABRAS, HAY POCOS EQUIPOS DE INVESTIGACION EN EL MUNDO QUE TRABAJEMOS EN ESTA LINEA DE INVESTIGACION. A PESAR DE LAS MEJORAS EN LOS RESULTADOS DE PIVE EN ANIMALES DE GRANJA, TODAVIA CONSIDERAMOS QUE LA PRODUCCION DE BLASTOCISTO ES BAJA Y SOBRE TODO POCO PREDECIBLE Y REPETIBLE ENTRE LABORATORIOS E INCLUSO ENTRE EXPERIMENTOS. DE LA COMPETENCIA O CALIDAD DE LOS OOCITOS DEPENDE MUCHO EL EXITO DE LA PIVE. EN ESTUDIOS ANTERIORES DE NUESTRO LABORATORIO HEMOS OBSERVADO UNA RELACION DIRECTA Y POSITIVA ENTRE EL DIAMETRO DEL OOCITO, EL DIAMETRO DEL FOLICULO Y EL DESARROLLO A BLASTOCISTO. EN NUESTRO PROYECTO ANTERIOR (AGL 2017-85837-R) HEMOS ESTUDIADO UN SISTEMA DE MADURACION BIFASICO BASADO EN 2 ETAPAS: 1) MEDIO PRE-IVM UTILIZANDO 200 NM CNP (PEPTIDOS NATRIURETICOS TIPO C) MAS ESTRADIOL CON OBJETO DE PARA LA MEIOSIS Y 2) SEGUIDA POR EL PASO DE LOS OOCITOS PRE-MADURADOS A UNA MADURACION IN VITRO (MIV) CONVENCIONAL. CON ESTE SISTEMA BIFASICO HEMOS AUMENTADO SIGNIFICATIVAMENTE EL PORCENTAJE BLASTOCISTOS OBTENIDOS DE OOCITOS DE CABRAS DE 1 A 2 MESES DE EDAD (DEL 17% AL 30% DE BLASTOCISTOS). EN EL PRESENTE PROYECTO, Y DEBIDO A QUE POR PRIMERA VEZ VAMOS A TENER OVARIOS DE CABRAS ADULTAS SACRIFICADAS EN MATADERO, VAMOS A DISEÑAR UN PROYECTO PARA COMPROBAR LA RESPUESTA DE LOS OOCITOS DE DIFERENTES CALIDADES A LOS TRATAMIENTOS DE MIV. ASI, PROBAREMOS NUESTRO NUEVO MEDIO EN 3 TIPOS DE CALIDADES DE OVOCITOS: A) OVOCITOS DE CABRAS PREPUBERES RECUPERADOS DE FOLICULOS MENORES 3 MM (MALA CALIDAD) B) OVOCITOS DE PREPUBERES RECUPERADOS DE FOLICULOS MAYORES DE 3 MM (CALIDAD MEDIA) Y C) OVOCITOS DE CABRAS ADULTAS RECUPERADOS DE FOLICULOS MAYORES DE 3 MM (BUENA CALIDAD). EXPERIMENTOS RECIENTES HAN DEMOSTRADO EL EFECTO POSITIVO SOBRE LA COMPETENCIA DE LOS OOCITOS DE LOS “OOCYTE SECRETED FACTORS” (OSF), COMO SON LA PROTEINA MORFOGENETICA OSEA 15 (BMP15) Y EL FACTOR DE DIFERENCIACION DEL CRECIMIENTO 9 (GDF9), AÑADIDOS A LA PRE-IVM. ESTOS OSF ACTUAN MEJORANDO LA COMUNICACION ENTRE LAS CELULAS DEL CUMULO Y LOS OOCITOS. SEGUN LA HIPOTESIS DE RICHANI Y GILCHRIST (2018), LOS OOCITOS VAN MEJORANDO SU COMPETENCIA PARA EL DESARROLLO A MEDIDA QUE CRECEN Y ESTO SE OBSERVA PORQUE ADQUIEREN LA CAPACIDAD DE RESPUESTA AL PEPTIDO EGF (EPIDERMAL GROWTH FACTOR), A TRAVES DE LOS MODULADORES DE AMPC (COMO CNP), JUNTO CON GDF9 Y/O BMP15. EN CONSECUENCIA, EL OBJETIVO DEL PRESENTE PROYECTO ES ESTUDIAR EN LAS 3 CALIDADES DE OOCITOS DE CABRA LA RESPUESTA EN EMBRIONES AL SISTEMA BIFASICO DE MIV JUNTO CON LA ADICION DE LOS OSF MP15 Y GDF9 A CONCENTRACIONES DE 50 Y 100 NG/ML EN LA PRE-IVM. ANALIZAREMOS EN ESTOS ESTUDIOS LOS SIGUIENTES PARAMETROS: EVALUAREMOS EL ESTADIO NUCLEAR CON HOESCHT, CRECIMIENTO DE OOCITOS POR TINCION CON AZUL CRESIL BRILLANTE (BCB), CONCENTRACION DE AMPC EN COCS Y CELULAS DE CUMULOS POR RIA, ANALIZAREMOS LAS UNIONES OOCITOS CELULAS DEL CUMULUS (GAPJ) POR MICROINYECCION DE AMARILLO LUCIFER FLUORESCENTE, CONCENTRACIONES DE ROS Y GSH (GLUTATION) EN LOS OOCITOS, ARN TOTAL,
StatusActive
Effective start/end date1/09/2131/08/24

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