Crioconservació d'ovocits i embrions per valorar la qualitat d'ovocits de remugants

A pesar de la gran cantidad de trabajos realizados en la producción in vitro de embriones (PIVE) de animales domésticos, durante los últimos 20 años, los porcentajes de blastocistos obtenidos se han mantenido muy constantes: del 30-40% en vacuno (Mermillod et al., 1999) y menor para el resto de las especies. La utilización de ovocitos de hembras prepúberes presenta la ventaja de obtener un mayor número de ovocitos por ovario pero sus resultados de blastocistos son menores que los obtenidos con hembras adultas (Armstrong, 2001). La selección de los ovocitos para su utilización en la PIVE se ha realizado exclusivamente atendiendo a caracteres morfológicos. La heterógenea y desconocida población de ovocitos recogidos de los ovarios y sometidos todos ellos a las mismas condiciones de maduración in vitro provocan grandes diferencias de resultados entre laboratorios e incluso entre experimentos realizados utilizando las mismas metodologías. Nuestra hipótesis de trabajo es que en la actualidad, aunque se ha conseguido mejorar significativamente la composición de los medios de cultivo utilizados, es necesario conocer las características de los ovocitos utilizados con objeto de determinar las características de cultivo más adecuadas a los diferentes tipos de ovocitos o al menos predecir los resultados obtenidos. La calidad de los ovocitos utilizados incidirá significativamente sobre su desarrollo hasta blastocisto, sobre su resistencia a la congelación y sobre su capacidad de formar embriones mediante las técnicas de transferencia nuclear. El objetivo del proyecto presentado es caracterizar la heterogénea población de ovocitos recogidos de los ovarios de matadero atendiendo a sus diámetros, cuantificación y activación de proteínas citoplasmáticas (MPF y MAPK), apoptosis ovocitaria, su desarrollo embrionario mediante FIV e ICSI (Inyección intracitoplasmática del espermatozoide) y su comportamiento después de la congelación-descongelación (...)