Noves tecnologies per al diagnòstic molecular de la sèpsia

Resum

La sèpsia és la resposta sistèmica de l’organisme, en la que es produeixen un conjunt de canvis humorals i cel·lulars, com a resposta a la invasió sanguínia per microorganismes i/o les seves toxines. En l’evolució clínica del pacient intervindran diferents factors com les característiques del microorganisme (inòcul, virulència), la immunocompetència de l’hostatger (patologia de base, factors genètics,...) i la rapidesa en administrar el tractament antibiòtic i de suport adequats. Degut a l’augment de l’expectativa de vida i dels tractaments i manipulacions exploratòries cada vegada més agressius, la incidència de sèpsia s’incrementa any darrere any. Aquesta síndrome té una mortalitat elevada, essent-ne la primera causa a la Unitats de Cures Intensives. A més a més, s’ha demostrat que aquesta s’incrementa en els malats que reben un tractament antibiòtic inadequat. Per tant, la rapidesa en l‘obtenció del diagnòstic microbiològic és crucial per a la disminució de la mortalitat. Actualment, el mètode de referència (gold standard) per al diagnòstic microbiològic de la sèpsia continua sent l’hemocultiu. La seva principal limitació és la mitjana de 15 hores d’incubació per a l’obtenció d’un resultat positiu i després, de 24-48 hores més per a la identificació i l’antibiograma, el que pot implicar un retard en l’aplicació d’una teràpia antibiòtica efectiva. A més a més, en els malalts en que ja s’ha administrat alguna dosi d’antibiòtic prèviament a la inoculació de l’hemocultiu, el rendiment de les tècniques microbiològiques convencionals és baix, el que fa que, en moltes ocasions, no s’arribi al diagnòstic etiològic i, per tant, es desconegui la sensibilitat als antibiòtics del microorganisme causant de la sèpsia. Tot i que fa diversos anys que existeixen assajos moleculars comercialitzats per a aquesta finalitat, només un (SeptiFAST, Roche, Manheim, Alemanya) ha estat extensament avaluat en l’àmbit hospitalari donant resultats variables i encara no ha estat àmpliament implementat._x000D_ En aquesta tesi doctoral s’ha avaluat la utilitat de la tecnologia PCR/ESI-MS per al diagnòstic molecular de la sèpsia. Aquesta tècnica es basa en una PCR d’ampli espectre seguida d’una espectrometria de masses d’ionització per electrospray i permet la identificació de bacteris i fongs a partir de mostra directa en unes 6 h. Durant l’avaluació de la primera versió (PLEX-ID), es van obtenir resultats prometedors però la sensibilitat de l’assaig era moderada (43,5%) en comparació amb els mètodes convencionals de diagnòstic. Tot i això, aquesta tecnologia va ser capaç de detectar fins a 12 microorganismes clínicament significantius que no van ser aïllats per l’hemocultiu. Degut a la baixa sensibilitat, es va redissenyar la tecnologia. La nova versió, anomenada IRIDICA, presenta com a canvi més important la utilització de 5 mL de sang (en comparació dels 1,250 mL utilitzats amb el PLEX-ID). Amb la nova versió de la tecnologia s’ha obtingut una sensibilitat del 73% en comparació amb els mètodes convencionals. A més a més, IRIDICA va detectar fins a 41 microorganismes clínicament significatius en pacients amb hemocultiu negatiu, la majoria dels quals ja havien rebut tractament antibiòtic. _x000D_ Aquesta tesi també explora la utilitat d’aquesta tècnica en diferents tipus de pacients. Es van analitzar mostres de pacients provinents del Servei d’Urgències i de pacients ingressats a la Unitat de Cures Intensives. En aquest últim grup, IRIDICA va demostrar una millor sensibilitat (83,0%) en comparació als mètodes convencionals. Aquests resultats són concordants amb un estudi multicèntric recentment publicat on s’avalua aquesta tècnica per al diagnòstic molecular de la sèpsia en malats crítics i que inclou pacients diferents Unitats de Cures Intensives de sis països europeus._x000D_ Per tant, IRIDICA és un sistema robust, ràpid i fiable per a la detecció de microorganismes en sang total i que ha demostrat que incrementa el nombre de casos de sèpsia confirmada microbiològicament incloent els pacients que ja estan en tractament amb antimicrobians. La utilització d’aquest sistema tindria més rellevància en malalts crítics ja que permetria una identificació precoç del microorganisme causant de la sèpsia. Per tant, es podria adequar abans el tractament antibiòtic, millorant la taxa de supervivència i el maneig del pacient.

Data del Ajut	11 de des. 2015
Idioma original	Català
Institució adjudicatària	Hospital Universitari Germans Trias i Pujol (HUGTiP)
Supervisor	Elisa Marto Català (Director/a), Vicente Ausina Ruiz (Director/a) & Montserrat Giménez Pérez (Director/a)