Neutrophilic asthma modelling and translational markers

Resum

Els models animals d’inflamació al·lèrgica de les vies respiratòries són eines útils per a estudiar la patogènia de l’asma. L’objectiu d’aquest treball ha estat establir un model d’asma murí a través de procediments patogènics propers als reals que permetin representar diferents perfils inflamatoris de les vies respiratòries com s’observa en la pràctica clínica, proporcionant un conjunt d’eines per a la comparació, investigació dels mecanismes de la malaltia i identificació de nous objectius diagnòstics o terapèutics. Triem per a aquest propòsit el ratolí C57BL / 6J, un cep consanguínia no esbiaixada Th2, l’àcar de la pols domèstica (HDM) com aeroalergeno, i instil·lacions intranasales com a via d’administració. Comencem amb la recerca de dosi combinada amb proves de durada d’exposició a al·lèrgens. Trobem evidències d’una resposta immune adaptativa impulsada per cèl·lules T en una configuració de dosi alta, 4 setmanes (4W), com es reflecteix en l’augment de cèl·lules T i la producció d’IgE específica d’HDM, juntament amb una resposta inflamatòria eosinofílica i neutrofílica i 1 hiperreactivitat de les vies respiratòries. Exposicions més prolongades van conduir a una disminució de la resposta de les cèl·lules T i a l’anul·lació de la hiperreactivitat de les vies respiratòries i els infiltrats eosinofílics, el que suggereix inmunorregulación per Th2. A partir d’aquestes dades, vam triar el protocol 4W de dosi alta encara que aquest model no aconseguís generar remodelació de les vies respiratòries. Amb l’objectiu de representar la remodelació de les vies respiratòries, vam provar l’administració de HDM en combinació amb SEB o α-galactosilceramida. L’addició de SEB va provocar la remodelació de les vies respiratòries però va inhibir la hiperreactivitat de les vies respiratòries i la infiltració de cèl·lules T CD4 +, i el α-Galcer no va aconseguir reproduir tots els trets cardinals de l’asma. Per tant, cap estratègia assoliment generar models d’asma competents que incloguin la remodelació de les vies respiratòries. Trobem que els antígens DerP1 i DerP2 de l’extracte HDM estandarditzat i reconstituït, pateixen degradació. Els antígens aeroalergénicos poden, per tant, patir una degradació espontània en condicions ambientals que condueixen a canvis conformacionals que modifiquen la resposta immunitària. Controlar l’estat de conservació de l’HDM, l’ús d’al·lèrgens parcialment degradats (model H4) va induir inflamació neutrofílica dominant, mentre que els antígens conservats (model H20) van provocar inflamació eosinofílica dominant. Tots dos models van mostrar evidència d’una resposta immune adaptativa impulsada per cèl·lules T CD4 + amb funcionalitat Th2 que va conduir a la producció d’IgE específica d’HDM i van desenvolupar amb èxit la inflamació i remodelació de les vies respiratòries. Anàlisi cinètics dels resultats de la resposta immune, van mostrar patrons complexos que variaven al llarg de el temps i eren concordants amb els perfils eosinòfils versus neutrofílicos. Aquesta desviació de el model H20-eosinofílico davant H4-neutròfil abasta una àmplia representació dels perfils inflamométricos observats en la pràctica clínica. Emprant aquests models, el fenotipat dels eosinòfils i neutròfils infiltrants per marcadors de superfície cel·lular relacionats amb la maduració, migració i activitat proinflamatòria versus immunomoduladora (Ly6, CD11b, SiglecF) ens va permetre identificar subpoblacions que variaven i fluctuaven al llarg de el temps. Aquestes subpoblacions canviants probablement s’involucrin implicacions funcionals encara no identificades.

Data del Ajut	1 de març 2022
Idioma original	Anglès
Supervisor	Ramos Borbon David (Director/a) & Candido Juarez Rubio (Director/a)