La Interleuquina-6 (IL-6) és una citoquina pleiotròpica relacionada amb un gran nombre de funcions fisiològiques i que juga un paper crític en condicions inflamatòries agudes, com després d’un traumatisme cranioencefàlic (TC), i cròniques, com l’esclerosi múltiple. En un model de TC com és la criolesió de l’escorça frontoparietal, els ratolins deficients totals de Il6 (IL-6 KO) mostren una resposta inflamatòria compromesa en comparació als seus controls. D’altra banda, en l’encefalomielitis autoimmune experimental (EAE), un dels models de ratolí d’esclerosi múltiple més utilitzat, els ratolins IL-6 KO són resistents. La IL-6 és produïda per múltiples cèl·lules perifèriques i del sistema nerviós central (SNC) com neurones, astròcits i microglia. No obstant, el paper específic de la IL-6 del SNC en els diferents contextos neuroinflamatoris és poc conegut. Per aquesta raó, hem generat ratolins deficients de Il6 astrocitària, neuronal i microglial després de creuar ratolins floxats de Il6 amb ratolins en els quals l’expressió de la recombinasa Cre està controlada pel promotor de la Proteïna àcida fibril·lar glial (Gfap-Cre), la Sinapsina-1 (Syn1-Cre) i el Receptor-1 de la quimioquina CX3C (Cx3cr1CreER), respectivament, per després criolesionar-los a l’escorça frontoparietal i/o inmunizar-los amb el fragment dels aminoàcids 35-55 de la glicoproteïna de mielina d’oligodendròcits (MOG35-55). Atès que el ratolí Cx3cr1CreER és un model induïble, tots els animals d’estudi van ser tractats amb tamoxifè i els diferents experiments es van iniciar a les 4 setmanes post-tamoxifè, assegurant així que la deficiència de Il6 fos específica de la microglia. A més, hem creat i validat un nou ratolí condicional reversible de IL6 (IL6-DIO-KO), que es caracteritza per la deficiència total de Il6 i per tenir la possibilitat de reactivar l’expressió de Il6 de manera Cre-dependent. En aquesta tesi, hem revertit l’expressió de la Il6 microglial en el nou ratolí deficient d’Il6 i estudiat el seu fenotip amb el model d’EAE. Els ratolins deficients de Il6 microglial criolesionats van mostrar el perfil transcripcional del còrtex frontoparietal dramàticament alterat a un dia post-lesió. No obstant això, aquests van tenir una resposta glial menys alterada als 3 i 6 dies post-lesió, suggerint que mecanismes compensatoris podrien estar presents. D’altra banda, la deficiència de Il6 en les diferents fonts cel·lulars del parènquima nerviós no van prevenir la inducció de l’EAE; tot i així, els resultats van revelar un efecte cèl·lula- i sexe-depenent. La deficiència de la Il6 astrocitària va reduir els símptomes clínics en femelles, mentre que una tendència es va observar en aquelles deficients de Il6 microglial durant el pic de la malaltia. No obstant això, la deficiència de la Il6 astrocitària i microglial no va afectar al curs clínic en mascles. A més, la deficiència de la Il6 neuronal no va alterar el desenvolupament de la malaltia ni en mascles ni en femelles. D’acord amb els resultats fenotípics, la resposta inflamatòria es va veure alterada per la deficiència de Il6 astrocitària i microglial, i no per la deficiència de Il6 neuronal. Tanmateix, l’expressió únicament de la Il6 microglial va ser suficient per iniciar alguns símptomes de paràlisis lleus i desencadenar una resposta inflamatòria contra el pèptid MOG33-55. En conjunt, els resultats obtinguts en aquesta tesi doctoral suggereixen que la IL-6 del SNC regula els processos neuroinflamatoris en resposta a la criolesió i a la immunització amb el pèptid MOG33-55 de manera cèl·lula-depenent. Per aquesta raó, l’estudi de la IL-6 secretada per les diferents fonts cel·lulars és essencial per comprendre la complexitat funcional de la IL-6.
La interleuquina-6 del sistema nervioso central controla la neuroinflamación: Estudio realizado en modelos de ratón de esclerosis múltiple y traumatismo craneoencefálico
Sanchis Tortosa, P. (Autor). 19 de juny 2020
Tesi d’estudis: Tesi doctoral
Tesi d’estudis: Tesi doctoral