Caracterització fenotípica i funcional de les cèl·lules T reguladores (naturals) en salut i malaltia (diabetis tipus 1)

Tesi d’estudis: Tesi doctoral

Resum

Les cèl·lules T reguladores naturals (nTregs) són limfòcits que es generen durant la selecció tímica i que formen part dels mecanismes que té el sistema immunitari per mantenir la seva homeostasi i controlar respostes autoreactives que poden conduir a l'autoimmunitat. Les nTregs són emigrants tímics que expressen de forma estable FOXP3, gràcies a canvis epigenètics que ocorren durant la seva maduració i que li permeten mantenir les funcions supressores. Les nTregs expressen també la cadena α del receptor de la IL-2, CD25 i això els hi confereix un fenotip activat. A més de CD25, les nTregs expressen altres marcadors com són: CTLA-4, GITR, CD127lo, CCR6, entre altres, i que són molècules que també s'indueixen en cèl·lules T activades durant la resposta. Tot i ser un marcador exclusiu al timus, l'expressió intracel·lular de FOXP3 el fa incompatible amb el seu ús per la purificació de les nTregs. Més endavant es va descriure que les cèl·lules T humanes activades també poden convertir-se en FOXP3+ i adquirir un fenotip supresor, tot i que la seva expressió és transitòria. Aquest fet, juntament amb l'absència de marcadors exclussius, fa que l'ús d'aquestes cèl·lules en immunoteràpia representi encara un repte. Per això, a partir de diverses aproximacions hem estudiat el fenotip de les cèl·lules T reguladores al timus i a la perifèria. De ĺestudi exhaustiu d́una àmplia col·lecció de timus pediàtrics (n=35) d́edats compreses entre els 2 dies i els 8 anys, hem confirmat que la freqüència de les poblacions tímiques varia amb ĺedat, tal i com śhavia descrit prèviament. A més, i per primera vegada, śha observat que la freqüència de les nTregs disminueix amb ĺedat. El fenotip d́aquesta població és estable amb el temps, a excepció de CD95, membre de la familia del TNF involucrat en apoptosi i activació cel·lulars. La freqüència de cèl·lules CD95+ dins de la població de nTregs incrementa amb ĺedat, i suggeriria un augment en susceptibilitat a ĺapoptosi mediada per CD95 que explicaria la davallada d́aquesta població amb ĺedat. Un cop les nTregs śexporten des de timus a la perifèria, es barregen amb cèl·lules T activades i cèl·lules T de memòria amb les que comparteixen diversos marcadors. En el nostre laboratori vam abordar la cerca de molècules característiques de nTreg fent servir una aproximació proteòmica seguida d́una anàlisi d́expressió gènica. De la comparació de cèl·lules nTreg de timus i nTreg de perifèria vam definir la galectina3 com a marcador d́aquesta població que śadquireix a perifèria. En cèl·lules Treg activades, funcionalment supressores, la seva expressió es troba a nivells similars de dos dels marcadors característics d́aquestes cèl·lules, FOXP3 i CTLA4. Finalment, es va abordar ĺestudi d́aquesta població en pacients amb diabetes tipus 1. Es va fer un estudi exhaustiu de caracterització fenotípica en mostres de sang de pacients en comparació amb controls, que va revel·lar una disminució de GITR en les Tregs. Aquest defecte no afectava a la seva capacitat de supressió, en canvi podria estar associat a una major susceptibilitat a ĺapoptosi.
Data del Ajut28 de gen. 2016
Idioma originalCatalà
SupervisorMaria Merce Marti Ripoll (Director/a)

Com citar-ho

'