Role of NSAID/RHO-GTPase mediated signalling in glia inflammation in primary and in organotypic cultures

Considerables estudis epidemiològics han establert que el tractament amb drogues antiinflamatòries no esteroidals (NSAIDs) redueixen el risc de la malaltia d'Alzheimer (AD), però encara, el seu mecanisme d'acció és controvertit. La hipòtesis general d'aquest projecte és que la família de les Rho-GTPases, que controla la dinàmica del citoesquelet, és un destí molecular de les NSAIDs en el cerebre, i que les NSAIDs proporcionen protecció en AD via les Rho-GTPases reduint la inflamació crònica i millorant la plasticitat sinàptica. El projecte presenta com a noves idees que els canvis en el citoesquelet d'actina juguen un paper en les malalties neurodegeneratives, i que les NSAIDs poden regular la plasticitat sinàptica independentment dels seus efectes anti-inflamtoris. L'estudi serà l'esforç coordinat de tres grups per aconseguir un anàlisi comprensiu del paper de les Rho-GTPases en la protecció mitjançada per les NSAID. El subprojecte 1 caracteritzarà l'efecte de les NSAIDs i les RhoGTPases (Rho, Rac, Cdc42) en la reactivitat inflamatòria d'astròcits i micròglia en cultiu i en cultius organotípics, estudiant diversos paràmetres d'inflamació. Les activitats de les RhoGTPases seran modulades o farmacològicament o molecularment, per infecció amb adenovirus contenint "el doble negatiu" o "les formes constitutivament actives" de les Rho-GTPases. El Subprojecte 2 analitzarà en talls hipocampals si el NSAID ibuprofè modula la LTP (expressió funcional de la plasticitat sinàptica). S'exploraran els mecanismes moleculars implicats, en particular els mecanismes dependents de cGMP, que és una de les vies de senyalització clau de la LTP. El Subprojecte 3 complimentarà l'anàlisi sobre la plasticitat sinàptica estudiant la reorganització en cultius. Finalment, en aquest subprojecte es caracteritzarà l'expressió de les Rho-GTPases en cerebres d'AD o de ratolins que sobre-expressin la proteïna precursora amiloide (APP)