Identificació de ceps bacterians resistents a quinolones, a través d'hibridació de colònies amb sondes específiques

La utilització de les noves quinolones ha comportat una creixent i preocupant freqüència d'aïllaments de patògens resistents a aquests agents bactericides, el qual ha estimulat enormement l'estudi dels mecanismes de resistència bacteriana a aquests compostos. S'ha descrit en \i E. coli\i0 i en altres espècies bacterianes que una de les principals causes de resistència són determinats canvis de bases en la "regió determinant de resistència a les quinolones" (QRDR) del gen \i gyrA\i0 . que originen un enzim DNA girasa resistent a l'acció d'aquests antimicrobians. En aquest projecte es proposa identificar a les soques portadores d'aquestes mutacions mitjançant hibridació de colònia amb una col·lecció de sondes capaces de detectar específicament les mutacions responsables d'aquesta resistència. En aquest estudi s'analitzaran soques resistents de diferent procedència de \i Campylobacter jejuni\i0 , espècie amb una alta freqüència d'aïllaments resistents, de \i E. coli\i0 , amb una freqüència molt menor i de \i Salmonella typhimurium\i0 , espècie en la que la taxa de resistents que es detecta és molt baixa. A més, es podran localitzar noves mutacions causants de resistència, donat que es seqüenciaran diferents regions del gen \i gyrA.\i0 de les soques que donin una hibridació negativa amb les sondes de la regió QRDR. Per altra part, mitjançant hibridació, en els aïllats resistents de \i E. coli\i0 es detectarà la presència de mutacions addicionals en els gens \i gyrB, parC y marR\i0 , causants també del fenotipus de resistència a quinolones. Així mateix, s'estudiarà la correlació entre la presència de les mutacions detectades, el nivell de resistència a diferents quinolones (CMIs) dels aïllats resistents i la seva susceptibilitat a antimicrobians no relacionats. Finalment, a través d'aquest treball es disposarà d'una col·lecció de sondes útils per a la identificació per hibridació de soques resistents a quinolones en les