Estudis moleculars sobre la ribonucleasa A: catàlisi, interacció enzim-substrat i plegament

La ribonucleasa A de pàncrees boví és una proteïna que ha estat estudiada tant a nivell estructural com funcional i és un bon model per al coneixement de la relació estructura-funció de les nucleases i, en general, d'enzims que actuen sobre substrats polimèrics. En aquest projecte d'investigació es planteja l'estudi de la ribonucleasa A centrat en la catàlisi, la interacció enzim-substrat i el procés de plegament. Dins l'estudi de la catàlisi i la interacció amb l'ARN s'analitzarà la funció dels centres d'interacció de fosfat no catalítics en els quals l'enzim interacciona de manera electrostàtica amb l'ARN i que es troben adjacents al centre catalític. També s'analitzarà la mobilitat de residus del centre catalític i de centres no catalítics amb la finalitat d'aprofundir en un model no estàtic d'interacció enzim-substrat. En els estudis de procés de plegament de la proteïna s'analitzarà el centre de nuceació que es localitza a la regió C-terminal, especialment la contribució de les interaccions hidrofòbiques d'aquest fragment sobre l'estabilitat global de l'enzim. Per analitzar aquests processos, s'obtindran formes modificades de la ribonucleasa A per mutagènesi dirigida.