Estudi de la inducció i la persistència de l'aneuploidia després de l'exposició \i in vivo\i0 a radiacions ionitzants

A l'espècie humana no existeix probablement un risc genètic de major importància que la aneuploidia. És la causa més comuna de defectes en el desenvolupament mental i d'aborts espontanis i s'ha relacionat amb l'aparició i desenvolupament del càncer. Tanmateix, malgrat la importància en la salut humana, poc es coneix sobre l'efecte aneugènic de les radiacions ionitzants. El present projecte d'investigació està relacionat amb la investigació de la inducció i persistència de l'aneuploidia després de l'exposició in vivo a radiacions ionitzants. Aquest treball es durà a terme mitjançant l'aplicació de tècniques de hibridació in situ fluorescent sobre cèl·lules somàtiques i germinals de ratolí. Degut a que al mercat no existeixen sondes pericentromèriques de ratolí, aquestes es produiran al nostre propi laboratori mitjançant tècniques de microdissecció, amplificació i marcat del DNA a la fi de poder-se utilitzar en protocols de FISH. Els objectius concrets de la present proposta són: 1. Generació de sondes paracentromèriques de DNA específiques per a tres cromosomes de ratolí. 2. Anàlisi de pèrdua anafàsica i de no-disjunció en limfòcits de melsa de ratolins irradiats. Aquest anàlisi es realitzarà en nuclis interfàsics de limfòcits binucleats. 3. Anàlisi del contingut cromosòmic dels micronuclis mitjançant la seva microdissecció i pintat revers sobre metafases de ratolí. 4. Anàlisi de la inducció i persistència de l'aneuploidia en espermatozoides de ratolí després de la seva exposició a radiacions.