Crioconservació d'ovocits i embrions per valorar la qualitat d'ovocits de remugants

Malgrat la gran quantitat de treballs realitzats a la producció in vitro d'embrions (PIVE) d'animals domèstics, durant els últims 20 anys, els percentatges de blastocists obtinguts s'han mantingut molt constants: del 30-40%-40 en boví (Mermillod et al., 1999) i menor per a la resta de les espècies. La utilització d'ovocits de femelles prepúbers presenta l'avantatge d'obtenir un major nombre d'ovocits per ovari però els seus resultats de blastocists són menors que els obtinguts amb femelles adultes (Armstrong, 2001). La selecció dels ovocits per a la seva utilització en la PIVE s'ha realitzat exclusivament atenent a caràcters morfològics. L'heterogènia i desconeguda població d'ovocits recollits dels ovaris i sotmesos tots ells a les mateixes condicions de maduració in vitro provoquen grans diferències de resultats entre laboratoris i fins i tot entre experiments realitzats utilitzant les mateixes metodologies. La nostra hipòtesi de treball és que en l'actualitat, encara que s'ha aconseguit millorar significativament la composició dels medis de cultiu utilitzats, és necessari conèixer les característiques dels ovocits utilitzats per tal de determinar les característiques de cultiu més adequades als diferents tipus d'ovocits o almenys predir els resultats obtinguts. La qualitat dels ovocits utilitzats incidirà significativament sobre el seu desenvolupament fins a blastocists, sobre la seva resistència a la congelació i sobre la seva capacitat de formar embrions mitjançant les tècniques de transferència nuclear. L'objectiu del projecte presentat és caracteritzar l'heterogènia població d'ovocits recollits dels ovaris d'escorxador atenent els seus diàmetres, quantificació i activació de proteïnes citoplasmàtiques (MPF i MAPK), apoptosis ovocitària, el seu desenvolupament embrionari mitjançant FIV i ICSI (Injecció intracitoplasmàtica de l'espermatozoide) i el seu comportament després de la congelació-descongelació (...)