Control de la replicació dels cromosomes eucariotes pel mecanisme de vigilància de la fase S

(...) La finalitat d'aquest projecte és estudiar de quina manera el mecanisme de vigilància de la fase S exerceix el seu control de protecció de la replicació davant d'agressions genotòxiques. Aquest treball es durà a terme en el llevat de gemmació \i Saccharomyces cerevisiae\i0, organisme eucariota en el qual la replicació cromosòmica està millor definida a nivell molecular. Ens proposem dos objectius concrets. En primer lloc, estudiar el possible control dels orígens de replicació a través de la inhibició de l'activitat Dbf4-Cdc. L'activació del mecanisme de vigilància porta hiperfosforilació de Dbf4 per Rad53. Es generararan mutants no fosforilables i s'estudiarà la possible pèrdua de control de bloqueig sobre els orígens de replicació. S'estudiarà si l'esmentada pèrdua dóna lloc a l'aparició d'inestabilitat genómica. En segon lloc, ens proposem la identificació de noves dianes del mecanisme de vigilància de la fase S. Proposem una primera fase basada en una aproximació oberta, que inclou copurificació bioquímica i rastreigs genètics, seguida de l'estudi en detall de la funció del control sobre aquests elements.