Contribucions a l'estudi de les bases moleculars de l'activitat catalítica, plegament i funcions biològiques de les riboinucleases

La ribonucleasas (Rnasas) que constitueixen la superfamilia de les Rnasas pancreàtiques poden considerar-se enzims idonis per a estudis sobre el procés de catàlisi, interacció enzim-substrat, estabilitat i plegament proteic. En l'estudi d'aquests enzims s'ha obert un ampli camp d'investigació associat a la participació d'alguns d'ells en funcions biològiques especialitzades i a la seva utilització com agents terapèutics. Els objectius del present projecte s'han organitzat en quatre apartats: 1) caracterització de la interacció enzim-substrat, catàlisi i bases moleculars de l'estabilitat de les Rnasas, utilitzant com enzims d'estudi la ribonucleasa A (Rnasa A), la proteïna catiònica d'eosinófils (ECP), la Rnasa de pàncreas humà (HP-Rnasa) i la Rnasa 8. Els objectius inclosos en aquest apartat s'han plantejat a partir de la informació sobre la Rnasa A i de les tècniques que disposem per a la caracterització del procés d'escissió de substrats complexos. 1. Determinació de les bases moleculars de les funcions biològiques de la proteïna catiònica de eosinòfils (ECP) i altres Rnasas. Els diversos enfocaments inclouen estudis estructurals de la ECP i altres Rnasas en relació a les bases moleculars de la citotoxicitat, l'anàlisi de l'expressió en distints tipus de cèl·lules diferenciades i la caracterització de les proteïnes de eosinòfils de gat, com model animal, que aportaran en conjunt nous coneixements tant a nivell molecular com cel·lular. 3. Mapejat del nucli hidrofòbic principal de les Rnasas pancreàtiques: contribució dels residus que formen part d'aquest nucli sobre l'estabilitat global de l'enzim i sobre el seu camí de plegament/desplegamiento/ induït per pressió. La informació obtinguda sobre l'efecte de la pressió en l'estructura proteica i la caracterització molecular de l'estabilitat, constitueixen una font d'informació bàsica en l'àmbit del disseny de proteïnes amb funcions biològiques específiques (...)