Caracterització i enginyeria d'inhibidors de carboxipeptidases d'\i Hirudo medicinalis\i0

Els inhibidors de proteases de naturalesa proteïca resulten interessants tant des d'un punt de vista bàsic com aplicat. El seu interès biomèdic resideix en part en el seu potencial ús com agents terapèutics per a la supressió dels efectes nocvos de les reaccions de defensa en les quals està involucrada la proteòlisi. Per part, molts inhibidors de poteases són molècules de massa molecular reduïda, susceptibles de ser objecte d'estudis sobre el seu procés de plegament i a l'ocupació de tècniques d'enginyeria de proteïnes per al disseny de funcionalitats noves o modificades. S'han aïllat un cert nombre d'inhibidors de serina-proteases a partir de \i Hirudo medicinalis\i0. En el present projecte proposem l'aïllament d'un inhibidor de carboxipeptidases a partir de la mateixa font natural, un tipus d'inhibidor encara no descrit, però l'existència del qual està garantitzada per la detecció d'activitat inhibidora de carboxipeptidases (del tipus A i del tipus B) en els extractes d'aquests espècimens. Una vegada s'hagi aïllat i caracteritzat la proteïna mitjançant estratègies clàssiques de química de proteïnes, es procedirà al seu clonatge i a la seqüenciació del seu cDNA. En l'actualitat s'estan dedicant molts esforços al disseny d'inhibidors quimèrics bifuncionals amb l'objecte d'estudiar la seva aplicació com agents terapèutics. S'intentarà la construcció d'un inhibidor quimèric doble que contingui les funcions inhibidores de triptasa i carboxipeptidasa de patata. S'assajarà la capacitat inhibidora de les molècules naturals, recombinants i quimèriques amb la finalitat d'estimar les possibilitats de la seva aplicació en el control de processos d'interès biomèdic (anafilaxis local, inflamació, etc