Bases estructurals per a la doble funcionalitat de la \beta-catenina com a coactivador transcripcional i regulador de les unions adherents

La \beta-catenina (BC) és una proteïna bifuncional que controla dues activitats cel·lulars alterades durant el procés de tumorigènesi de còlon. Per una banda, la BC és necessària per a l'establiment de les unions adherents i per altra, pot desplaçar-se al nucli i unir-se al factor transcripcional hTcf-4, incrementant l'expressió d'una sèrie de gens involucrats en el desenvolupament tumoral. Aquesta activitat de BC depén únicament dels nivells d'aquesta proteïna lliure al citosol, nivells regulats negativament pel antioncogen APC, freqüentment mutat en càncer de colon. L'objectiu d'aquest treball es caracteritzar estructuralment la interacció entre la BC (a través del domini denominat "armadillo") i hTcf-4, i establir els requeriments que la diferencien de les associacions de BC amb altres proteïnes, com APC i E-cadherina, que s'uneixen a la mateixa zona. Per a conseguir això, s'expressaràn tots els dominis d'interacció d'aquestes proteïnes i es delimitaràn les zones mínimes d'associació, utilitzant assaigos d'afinitat. En paral·lel es compararàn les estructures dels dominis "armadillo" de BC i d'altres proteïnes que també el contenen però que són incapaços d'unir hTcf-4, com hTcf-4 i p120ctn. Amb aquestes dades, es dissenyarà un model compatible amb les diferències estructurals que pugui explicar les especificitats de la interacció. Un cop validat, es procedirà al disseny d'inhibidors peptídics de la interacció hTcf-4/BC, que no afectin a la interacció d'aquesta amb E-cadherina o APC. L'especificitat d'aquests inhibidors es comprovarà amb assaigos d'afinitat. Posteriorment, els més específics s'utilitzaràn en assaigos \i in vivo\i0 determinant llur capacitat per a reduir : a) l'activitat transcripcional del complex BC/hTcf-4 en línies cel·lulars i b) el creixement de tumors generats espontàniament en ratolins \i mins\i0 . La caracterització estructural de la interacció hTcf-4/BC i l'obtenció d'inhibidors específics de la mateixa tenen una evident importànc