Anàlisi dels factors clau en el plegament incorrecte i proteolisi de proteïnes recombinants produïdes en \i Escherichia coli\i0

S'estudiarà la formació de cossos d'inclusió i la proteolisis, en \i I. coli\i0 recombinant, d'una sèrie de proteïnes de fusió \beta-galactosidasa i de mutants del factor de creixement de fibroblasts (bFGF) expressats sota el control de sistemes termoinducibles i inducibles per IPTG. Amb aquestes dues proteïnes model s'optimitzaran protocols de producció que augmenten el rendiment volumètric de la producció de proteïnes recombinants. En el nostre laboratori s'ha construït una col·lecció de proteïnes de fusió \beta-galactosidasa estretament relacionades amb la mateixa seqüència d'aminoàcids però amb diferents posicions relatives dels dominis homòlegs i heteròlegs. Amb elles pretenem estudiar les influències de la posició relativa dels dos dominis sobre la mitjana de la seva vida i sobre el patró de formació i composició dels cossos d'inclusió, així com sobre la seva producció en conreus d'alta densitat. Aquest treball es realitzarà parcialment per nosaltres en el laboratori de la Dra. Rinas. D'altra banda, es construiran mutants puntuals de la proteïna bFGF reemplaçant cisteínes per serines en llocs estructuralment crítics per a estudiar el comportament dels mateixos pel que fa a les propietats biotecnològiques esmentades anteriorment. La construcció d'aquests mutants es portaria a terme per membres del grup alemany en el nostre laboratori