Anàlisi citogenètica molecular i immunocitogenètica de l'espermatogènesi en individus infèrtils: aplicació al consell genètic

Recents estudis indiquen que pacients infèrtils poden presentar un increment d'espermatozoides aneuploides i que aquesta incidència pots ser reflex de diferents graus d'afectació del procés meiòtic. Una possible hipòtesi és que aquestes anomalies siguin degudes a una reducció en el grau de recombinació i a anomalies del aparellament sinàptic que produeixin bloqueig meiòtic i no-disjunció de bivalents cromosòmics i que al seu torn ocasionin oligozooespèrmia i increment d'espermatozoides amb anomalies cromosòmiques numèriques. Fins el moment, són molt escassos els estudis del patró de recombinació en individus fèrtils i no existeixen en individus infèrtils. Últimament, s'han descrit tècniques que combinen la immunocitogenètica amb l'anàlisi citogenètic molecular i que són una nova i potent forma de detectar punts de recombinació en extensions de bivalents en profase I. Ens proposem estudiar el procés de recombinació meiòtica i l'aparellament en espermatocits d'individus infèrtils per a determinar si presenten modificacions del patró de recombinació i alteracions de l'aparellament sinàptic amb la finalitat de verificar la hipòtesi abans indicada. Per a això aplicarem una tècnica immunocitogenètica per a la detecció de MLH1 en espermatocits que permetrà determinar la freqüència de punts de recombinació. La distribució específica per a cadascun dels 23 complexos sinaptonèmics es realitzarà amb FISH d'escandalls cromosòmiques, especialment mitjançant l'adequació a extensions de complexos sinaptonèmics d'un nou mètode de FISH multicolor (cenM-FISH) el qual permetrà la identificació simultània de tots els centròmers en els espermatocits als quals prèviament se'ls hagi detectat els punts de recombinació.